O porte do Mastino Napoletano é realmente impressionante. Ele possui um aspecto maciço, forte, robusto e majestoso. É um animal que chama a atenção e raramente passa despercebido. Mas o que o torna fascinante é, sobretudo, a idéia de força e de potência que o seu corpo evoca, associada a seu olhar calmo e suave. Ele possui uma musculatura potente e peito amplo e bem desenvolvido, o que torna sua andadura singular, pesada, lenta e gingada como a do urso. O seu corpo retangular e sua maciça cabeça enrugada dão a impressão de uma estrutura excessivamente forte. Suas rugas faciais continuam abaixo do queixo e do pescoço, formando uma barbela proeminente. O crânio é largo e achatado no seu topo e seu nariz é retangular, largo e curto.
O enorme Mastino Napoletano já vem ao mundo superdotado e sua multiplicação de peso é surpreendente. Nasce em média com 500 gramas e aos 2 meses, acredite se quiser, seu peso gira em torno de 12 quilos. Com meio ano de vida, pode beirar os 50 quilos, bem mais que um Pastor Alemão adulto. As doses diárias necessárias de cálcio e vitaminas são o dobro em relação às indicadas para raças como o Rottweiler e o próprio Pastor. Este brutamontes só atinge seu peso máximo por volta dos 3 anos de idade. Nesta fase, chega a comer 2,5 quilos de uma boa ração por dia.
A sua pele é grossa, abundante e solta sobre todo o corpo, em especial na cabeça, onde se formam numerosas pregas e rugas, e na parte inferior do pescoço, onde forma uma dupla barbela. Tem a pelagem curta, densa e de textura áspera, podendo ser encontrada nas cores preto, cinza, mogno, fulvo e tigrado.
O Mastino Napoletano tem a maior cabeça da espécie canina. Seu aspecto é tão peculiar que é considerada a característica mais marcante da raça. O crânio é extremamente largo e achatado entre as orelhas. O focinho muito grosso e curto colabora ainda mais para a aparência gigantesca. Suas rugas abundantes e a pele solta ao redor do pescoço (barbelas) lhe dão um ar feroz e primitivo. Entre tantas rugas, há uma que é considerada sua marca registrada e um bom exemplar deve sempre tê-la: é aquela que sai da altura dos olhos e vai até o canto da boca, gerando uma expressão para lá de carrancuda. Seus maxilares são poderosos e podem apertar como tornos. Ele pode triturar ossos grandes e duros com extrema facilidade.
Sua altura (na cernelha) varia entre 60 e 77 cm e seu peso entre 50 e 70 quilos. Os cães de destaque respeitam fielmente a altura pedida pelo padrão (até 77 centímetros para os machos), mas superam em muito a marca dos 70 quilos, que também é delimitada. Os exemplares italianos, tidos como os melhores do planeta, têm uma média de 85 quilos, no entanto há alguns ótimos exemplares que beiram os 100 quilos. O Mastino Napoletano, apesar de seu peso, é um cão bastante ágil. Embora tenha aparência de "molenga" devido à sua pele solta, ele é capaz de saltar a uma altura de aproximadamente 1,5 metros.
